Proceso de producción del concentrado técnico de Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus
El proceso de producción del concentrado técnico de Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus consta de dos secciones principales: la adquisición de materias primas virales,y la extracción y conservación del virus.
Adquisición de materias primas virales
Control de las dietas artificiales en interiores
Basándose en los hábitos alimentarios de Helicoverpa armigera, se seleccionan de 3 a 5 formulaciones de alimentación artificial.se selecciona para la producción la fórmula que favorece la cría continua y una alta capacidad de puesta de huevos.
Crianza de Helicoverpa armigera en el interior
Los gusanos de algodón capturados en estado silvestre se domestican mediante un régimen de alimentación de sustitución gradual: alimento vegetal puro → alimento mixto vegetal y alimento artificial → alimento artificial completo,para establecer una cepa de laboratorio para la cría en masa.
Inoculación con virus
Cuando aproximadamente el 80% de las larvas alcancen el tercer estadio, las semillas purificadas de virus (libres de bacterias diversas) se diluyen en una suspensión viral con una concentración de 1,0 × 104 a 1,0 × 107 PIB/ml,que se mezcla en la dieta para la alimentación de las larvas.
Colección de larvas muertas enfermas
La observación comienza 3 días después de alimentar a la dieta contaminada por el virus.Las larvas muertas y moribundas con cuerpos hinchados y abdomen rojizo se recogen dos veces al día (mañana y tarde) hasta que se complete la recolección..
Extracción y preservación del virus
Se añade a los cadáveres larvales una cantidad adecuada de agua desionizada y se tritura la mezcla en estiércol utilizando un homogeneizador multifuncional.La molienda se termina una vez que el tamaño de las partículas cumple con las especificaciones.
Detección y conteo
La identificación y el recuento cuantitativo se realizan mediante microscopio electrónico y microscopio óptico respectivamente.
Almacenamiento de virus
Las suspensiones de virus calificadas se llenan en bidones de plástico sellados y se almacenan en un almacén frío a -10°C a -20°C para su uso posterior.
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