Abstracto
El gusano cogollero, Spodoptera frugiperda, es una de las plagas más importantes del maíz, que invadió China recientemente. Para determinar el efecto de control de Nucleopoliedrovirus múltiples de Autographa californica (AcMNPV) en larvas de S.frugiperda, se estudió y analizó la actividad insecticida y el efecto de biocontrol del AcMNPV en S.frugiperda mediante los métodos de bioensayo y prueba de eficacia de campo. Los resultados mostraron que la concentración letal media (LC50)de AcMNPV actuando sobre el 2Dakota del Norteel estadio larvario de S.Frugiperda fue 2,9x 107PIB/mL. La eficacia de control promedio de 107Suspensión PIB/mL AcMNPV+Bt (1500 mL/hm2) en S.frugiperda fue del 68,99% el día 10thdía y 66,87% el día 15thdía después de la administración. Finalmente, se utilizó el software DNAMAN 6.0 para identificar la homología del ADN de los insectos muertos, y los resultados mostraron que las secuencias de los genes polh, lef-8 y lef-9 del insecto muerto y S．Frugiperda eran 100 % idéntico. Todos los resultados anteriores podrían verificar aún más que AcMNPV puede desempeñar un papel clave en el control de S．frugiperda．. Se sugiere que 107PIB/mL AcMNPV＋BT suspensión (1500mL/hm2) debe aplicarse en el momento de mayor aparición de larvas jóvenes de S.frugiperda, y después de las 4:00-5:00 pm en un día soleado para evitar la influencia de la alta temperatura y la luz, para que la preparación del virus pueda desempeñar un mejor papel. papel y mejorar su efecto de control sobre S.frugiperda．
Palabras clave: AcMNPV;Spodoptera frugiperda;Peste de lepidópteros;larva;bioplaguicida;AcMNPV＋Suspensión Bt;actividad insecticida;prevención y control verde
Spodoptera frugiperda es una plaga migratoria omnívora que entró por primera vez en China desde Myanmar en 2019 y se ha extendido rápidamente a 1.518 distritos en 26 provincias y municipios de China, lo que representa una grave amenaza para la seguridad alimentaria de China. Hasta ahora, en la estrategia de control del gusano cogollero, El control de los brotes de gusano cogollero todavía depende del uso intensivo de pesticidas químicos.El uso excesivo de pesticidas químicos puede causar fácilmente resistencia a las plagas, proliferación de residuos y contaminación ambiental.Una serie de graves problemas han restringido seriamente el desarrollo sostenible de la agricultura moderna. De ahí el uso de métodos de control biológico o de sustitución de biopesticidas.El uso de pesticidas para controlar el gusano cogollero es cada vez más importante y ha recibido una atención cada vez mayor.
El nucleopoliedrovirus múltiple AcMNPV de Autographa californica es un virus de poliedrosis nuclear integrado en múltiples granos aislado de la larva de Argyria alfalfa. Puede infectar de forma cruzada más de 30 tipos de plagas de lepidópteros como la polilla de la remolacha, la polilla de la col, Argyria argyra y Calyptera teristoides. El tipo mixto con Bt y otros insecticidas y virus de plagas no objetivo como sinérgicos tiene un efecto sinérgico obvio en muchas plagas de Noctuidae, amplía aún más el espectro insecticida y mejora el efecto insecticida.AcMNPV es un nuevo biopesticida de virus de insectos desarrollado por Wuhan Unioasis Biological Technology Co., LTD.Es una combinación del virus de la poliedrosis nuclear Argyria alfalfa y un potente sinérgico del virus Bt.Con buena actividad insecticida, A se ha aplicado ampliamente en hortalizas, árboles frutales, arroz y otros campos.En este artículo, se detectó y evaluó la actividad insecticida y el efecto de biocontrol del nucleopoliedrovirus múltiple (AcMNPV) de Autographa californica contra Spodoptera frugiperda mediante ensayos de actividad de laboratorio y experimentos de campo, con el fin de proporcionar datos que respalden la amplia aplicación del virus de la poliedrosis nuclear en el control biológico de Spodoptera frugiperda en maíz.Proporciona bases teóricas para el registro y aplicación del agente de suspensión de AcMNPV más Bt en el control del gusano cogollero.
1.Materiales y métodos
1.1Prueba de virus y agentes biológicos.
El virus probado fue el nucleopoliedrovirus múltiple de Autographa californica (AcMNPV). El 20 de mayo de 2019, se recolectó Spodoptera frugiperda del campo de maíz en la ciudad de Xiantao, provincia de Hubei, y la prueba de detección de infección por virus se realizó en el laboratorio de Wuhan Unioasis Biological Technology Co. , LTD.(En el que Autographa Californica multiplenucleopolyhedrovirus AcMNPV tiene una alta actividad infecciosa contra Spodoptera frugiperda), las larvas de Spodoptera frugiperda se criaron para aumentar y propagarse. Las larvas muertas infectadas con el virus se trituraron con agua, se filtraron a través de 3 capas de gasa y el filtrado se centrifugó a 600 r/min y 300 r/min. El microcuenta fue 1,8 × 1010poliedros virulentos por ml (PIB de cuerpo de inclusión poliédrico), es decir, para obtener un grado técnico puro de virus de poliedrosis (1,8 x 1010PIB/mL), conservar a baja temperatura y reservar.
El agente biológico probado fue la poliedrosis nuclear de Autographa california. Bacillus thuringiensis para abreviar AcNPV.Bt (1,0 × 107 PIB/mL).Es desarrollado por Wuhan Unioasis Biological Technology Co., LTD y producido por su filial Wuhan Chuqiang Biological Technology Co., LTD.
1.2Insectos de prueba
El insecto experimental fue Spodoptera frugiperda.El 20 de julio de 2019, se recolectaron las larvas de Spodoptera frugiperda del campo de maíz de verano en la aldea de Banqiao, ciudad de Dachangzhen, condado de Tongshan, provincia de Hubei, y se llevaron al laboratorio del Instituto de Investigación de Fertilizantes y Suelos para Protección Vegetal de la Academia de Agricultura de Hubei. Ciencias. Se alimentaron hojas de maíz frescas y tiernas con una sola cabeza en placas de Petri de plástico desechables (diámetro 8 cm, altura 3 cm).Las condiciones de alimentación en el interior fueron: (25 ± 1) ℃ y humedad relativa del 60% al 70%, el fotoperíodo es de 16L:8D.Después de múltiples generaciones de reproducción, los bloques de huevos frescos y esterilizados se conservan para su uso.
1.3Actividad de laboratorio del nucleopoliedrovirus múltiple (AcMNPV) de Autographa californica contra Spodoptera frugiperda
Seis gradientes de concentración, 1,0 ×109, 1,0 ×108, 1,0 ×107, 1,0 ×106, 1,0 ×105, 1,0 ×104se diseñaron en este experimento. Primero, el TC de AcNPV se diluyó a 1,0 × 109PIB/mL, y luego se diluyó 10 veces para obtener otros diluyentes con diferentes concentraciones. El experimento se trató con control en blanco. Se realizaron un total de 7 procesos, repitiéndose cada proceso 3 veces.
Se adoptó el método de alimentación con segmentos de hojas, es decir, primero se trataron hojas jóvenes de maíz fresco (largo 2 cm x ancho 2 cm) con un aerosol de suspensión de virus, luego se alimentaron las larvas y se alimentaron una sola cabeza en placas de Petri.Las tiras de alimentación fueron: temperatura (25 ± 1) ℃, fase a humedad (60% ~ 70%), fotoperíodo (16L:8D). Después de comer las hojas de maíz tóxicas, se deben agregar hojas de maíz frescas no tóxicas. inmediatamente. Se trataron repetidamente 48 larvas de gusano cogollero del segundo estadio. Parte de referencia 9 {9-11}, considerando los cambios de la proliferación del virus en las células y huéspedes de la familia de las polillas, el número de insectos muertos debido al virus y se investigó el número total de insectos muertos a los 7 y 10 días después de la infección, se calculó la tasa de mortalidad y se calculó la LC50.
1.4Prueba de campo sobre el efecto de control de 10 millones de suspensiones de AcMNPV.Bt en larvas de gusano cogollero
La prueba de eficacia de campo se realizó en el campo de maíz de verano de la aldea de Xiaoyuan, ciudad de Chuangwang, condado de Tongshan, provincia de Hubei.La parcela de prueba tiene un total de 1500 m.２, el tipo de suelo es suelo cálcico, el valor de pH es 6,8, el contenido de materia orgánica es 13,9% y la fertilidad es media a alta.Se siembra maíz durante todo el año y la variedad de maíz es Xiyu No. 3. El 13 de julio. ,2020, 45% fertilizante compuesto 750kg//hm２Se aplicará como fertilizante base y se sembrará.Desde 2019, ha habido una incidencia grave del gusano cogollero en este campo.
Un total de 10 millones de suspensiones AcMNPV.BT (1500mL/ hm2) y benzoato de emamectina al 15%. Suspensión de indocarb (300 ml/ hm2), insecticida de uso común y control blanco fueron tratados con 3 tratamientos.Cada tratamiento se repitió 4 veces, con un total de 12 parcelas experimentales, cada una de las cuales cubría un área de 100 m2
En la tarde del 26 de agosto de 2020 (cuando aparecen con frecuencia las larvas de Spodoptera frugiperda), rocíe el pesticida una vez por la noche.Se utiliza el rociador eléctrico de mochila multifunción 3WBJ-16DZ de la marca Lebang, con una presión de trabajo de 0,40~0,60 MPa, un diámetro de orificio de 1 mm y un caudal de 60~85L/h.El día de aplicación de pesticidas es soleado, con una temperatura de 23-32 ℃.Realizar encuestas los días 1, 3, 5, 7, 10 y 15 después de la aplicación.Durante la investigación, se tomaron 10 puntos de muestreo aleatorios de cada parcela y se estudiaron continuamente 10 plantas en cada punto, totalizando 100 plantas.Se registró el número de insectos vivos, muertes, envenenamientos y enemigos naturales de cada planta de maíz.La fórmula de cálculo relevante es la siguiente;
Tasa de disminución de insectos =(número de insectos vivos antes de la aplicación - número de insectos vivos después de la aplicación)/número de insectos vivos antes de la aplicación
Efecto de prevención y control=(Disminución de la tasa de insectos en el área de tratamiento- Disminución de la tasa de insectos en el área de control)/(100- Disminución de la tasa de insectos en el área de control)*100%
1.5Identificación molecular de ACMNPV.
1) Analizar muestras de virus.Seleccione el licor madre de ACMNPV para la determinación de la actividad en interiores (muestra 1), la preparación biológica 10 millones de ACMNPV.Bt SC (muestra 2), cadáveres de insectos infectados por virus después de las pruebas de eficacia de campo (muestra 3) y las larvas de gusano cogollero de segunda generación infectadas con cadáveres de insectos recolectados en la muestra 3 (muestra 4) como muestras de virus de prueba, para verificar si AcMNPV en los 10 millones de ACMNPV.Bt tiene actividad bactericida contra las larvas del gusano cogollero.
2) extracción de ADN.Tome 1,0 ml de muestra de AcMNPV, agregue 99,0 ml de agua destilada y oscile completamente durante 1 minuto.Tome 300 μl de suspensión después de la oscilación, agregue 100 μl de solución de craqueo alcalino y báñelo con agua a 37 ℃ durante 30 minutos.Agregue 200 μL de tampón Tris·HCl y centrifugue a 10000 r/min durante 8 minutos.Llevar el sobrenadante a un tubo de centrífuga, agregar 5 μL de Proteasa K y 60 μ L de SDS, baño de agua a 65 ℃ durante 2 horas, retirar y enfriar a temperatura ambiente.Agregue bien 650 μL de fenol saturado de Mix L Tris, centrifugue a 10000 r/min durante 5 minutos y lleve el sobrenadante a un nuevo tubo de centrífuga.Agregue 650 μl de líquido mezclado de fenol y cloroformo (relación de volumen 1:1), centrifugue a 10000 r/min durante 5 minutos y luego lleve el sobrenadante a un nuevo tubo de centrífuga.Agregue 650 μl de líquido mezclado de cloroformo y alcohol isoamílico (relación de volumen 24:1), centrifugue a 10000 r/min durante 5 minutos y finalmente lleve el sobrenadante a un nuevo tubo de centrífuga.Mida la concentración de ADN utilizando un espectrofotómetro.
3) amplificación por PCR.Usando el sistema estándar de supermezcla T3: muestra de ADN 2 μL. Cebadores de 0,5 μL para antes y después, supermezcla T3 de 18 μL y ddH₂O7 μL.La condición de amplificación por PCR es 95 ℃.Después de 3 minutos de predesnaturalización, se realizan los siguientes ciclos: 98 ℃ durante 15 segundos, 52 ℃ durante 20 segundos, 72 ℃ durante 20 segundos y finalmente 72 ℃ durante 5 minutos, en total 42 ciclos.
4) Electroforesis en gel de agarosa de ADN.Tome el producto de amplificación por PCR de 2 μl y el marcador de ADN de 5 kb y colóquelo en gel de agarosa y realice una electroforética a 180 V durante 20 min.Después de la electroforesis, observe los productos de la PCR en el sistema de imágenes de gel.
Imprimación aguas arriba de Polh:
AGGGTTTCCCAGTCACGGGCTGAG-GATCCTTT
Imprimación posterior de Polh:
GAGCGGATAATTTCACACTGGTGTGTG-CAAACTCCTT
Cebador aguas arriba Lef-8:
AGGGTTTCCCAGTCCACGCACGGGAAAT-GAC
Cebadores posteriores Lef-8:
GAGCGGATAATTTCACATTGTACGGATCTTTCGGC
Cebadores ascendentes Lef-9
AGGGTTTCCCAGTCACGAAAACGGGTACGCGG
Cebadores posteriores Lef-9:
GAGCGGATAATTTCACATTGTCACCGTCAGTC
Finalmente, aplique el software DNAMAN6.0 para comparar las secuencias medidas de polh, lef-8 y lef-9.
1.6Análisis y procesamiento de datos.
Los datos experimentales se procesaron utilizando el software de análisis estadístico de datos IBM SPSS 22.0.
En el experimento de determinación de la actividad insecticida del virus, se cuenta el número de insectos vivos y muertos tratados con cada concentración, y se calcula la tasa de mortalidad y el porcentaje ajustado de muertos, y se convierten en valores de probabilidad.La concentración de cada tratamiento se convierte en valores de lg.La ecuación de regresión de virulencia (pendiente ± SE) se calcula mediante valores y pesos de probabilidad de trabajo, y LC50Valor y su límite de confianza del 95%, y finalmente realizar la prueba de chi-cuadrado (2).En el experimento del efecto de control de campo, se contó el número de insectos vivos en cada tratamiento y se calculó la tasa de reducción de plagas.El efecto de control se calculó utilizando la fórmula de edición de Microsoft Excel.Se utilizó el método de Duncan para el análisis y se utilizó ANOVA unidireccional para comparar las diferencias significativas entre los tratamientos.
Todos los gráficos del texto se crearon utilizando el software Microsoft Excel.
2.Resultados y análisis
2.1Actividad insecticida de AcMNPV contra larvas de Spodoptera frugiperda
Los resultados de las pruebas de actividad en interiores (Tabla 1) muestran que después de 7 días de tratamiento, la LC50de AcMNPV actúa sobre larvas de segundo estadio de Spodoptera frugiperda es 4,1x107PIB/ml y LC90es 1.05x108PIB/mL.Después de 10 días de tratamiento, la LC50de AcMNPV actúa sobre larvas de segundo estadio es 2,9x107PIB/ml y LC90es 7.8x107PIB/mL.la LC50y LC90de las acciones del AcMNPV en las larvas del segundo estadio del gusano cogollero después de 7 días de tratamiento fueron superiores a 10 días, lo que indica que el AcMNPV exhibió una buena actividad insecticida contra las larvas de Spodoptera frugiperda a los 7 días.
2.2 Efecto de control de campo de AcMNPV.Bt actúa sobre las larvas de Spodoptera frugiperda
Los resultados de los ensayos de eficacia de campo mostraron que 10 millones de AcMNPV.BtSC (1500 ml/hm2) tuvo un efecto relativamente lento sobre las larvas de Spodoptera frugiperda.El efecto de control promedio en el primer, tercer y quinto día después de la pulverización fue del 11,57%, 16,23% y 15,56%, respectivamente.El efecto de control medio al séptimo día después de la pulverización fue sólo del 21,88%.Sin embargo, el décimo día después de la fumigación, el efecto de control de insectos aumentó repentinamente al 68,99%, y el efecto de control promedio el día 15 después de la fumigación también fue del 66,87%.Sin embargo, en comparación con los agentes químicos Emamectina Benzoato+ Indoxair Conditioningarb 15% (300mL/hm2), tuvo un buen efecto letal sobre las larvas de Spodoptera frugiperda, lo que puede reducir rápidamente el número de poblaciones de insectos.El efecto de control promedio en el primer, tercer, quinto y séptimo día después de la medicación fue del 91,39%, 92,66%, 90,71% y 87,19%, respectivamente.Sin embargo, el efecto de control promedio en el día 10 comenzó a disminuir, solo al 67,63 %, y el efecto de control promedio en el día 15 había disminuido al 51,60 %.Consulte la Tabla 2 para obtener más detalles.
Al mismo tiempo, también encontramos que la tasa de disminución de insectos en el área de control fue negativa el primer, tercer y quinto día después del tratamiento, lo que indica un aumento en el número de insectos.Al séptimo día después del tratamiento, comenzó a ser positivo (la población de insectos comenzó a disminuir).La tasa promedio de disminución de insectos en los días 10 y 15 fue del 38,25% y 47,00% respectivamente, lo que muy probablemente está relacionado con el hecho de que algunas de las larvas de Spodoptera frugiperda comenzaron a pupar en el suelo y las generaciones se superpusieron después de 10 a 15 días. .
En resumen, se puede observar que los 10 millones de AcMNPV.BtSC (1500 ml/hm2) tiene cierto efecto de control sobre Spodoptera frugiperda, pero su efecto es lento y su eficacia es de aproximadamente 10 a 15 días después de la aplicación.
2.3 Efectos del AcMNPV.Bt sobre enemigos naturales
Durante los experimentos de campo, se observaron los efectos de 10 millones de AcMNPV.También se investigó la suspensión de Bt sobre enemigos naturales de las plagas del maíz, como arañas, mariquitas y escarabajos.Los resultados mostraron que 10 millones de AcMNPV.La suspensión de Bt no tuvo daños significativos a enemigos naturales como arañas, mariquitas y escarabajos, con un promedio de 13,4 enemigos naturales por cada 100 plantas.Sin embargo, los agentes químicos Emamectina Benzoato+ Indoxair Conditioningarb 15% suspensión tuvieron un efecto tóxico significativo sobre enemigos naturales como arañas, mariquitas y escarabajos.El primer día después del tratamiento, el número promedio de enemigos naturales en 100 plantas de maíz fue solo 3,1, y el tercer día después del tratamiento, solo se encontraron 5,2 enemigos naturales de diversos tipos (Figura 1).Se puede ver que los 10 millones de AcMNPV.La suspensión Bt tiene un buen efecto protector sobre los enemigos naturales de las plagas, mientras que la suspensión Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15% causa un daño relativamente mayor a los enemigos naturales.
2.4 Identificación molecular de AcMNPV
Los resultados de la amplificación por PCR de diferentes muestras de prueba mostraron que los fragmentos de amplificación de polh, lef-8 y lef-9 de las muestras 1, 2, 3 y 4 eran consistentes y de tamaño correcto.Los productos de PCR de los genes polh, lef-8 y lef-9 fueron 0,54, 0,716 y 0,29 kb, respectivamente (Figura 2), lo que demuestra que AcMNPV tiene actividad insecticida contra las larvas de Spodoptera frugiperda.
Finalmente, se utilizó el software DNAMAN 6.0 para realizar el alineamiento de secuencias en los fragmentos amplificados de polh, lef-8 y le.f-9 en las muestras 1, 2, 3 y 4 (Figura 3).Los resultados mostraron que la similitud entre las secuencias amplificadas de polh, lef-8 y lef-9 en las muestras 1, 2, 3 y 4 fue del 100%, lo que indica que todas las muestras 1, 2, 3 y 4 se originan en mismo virus AcMNPV.
3. Discusión
AcMNPV es un virus con forma de bastón de insecto que infecta el cuerpo de los insectos al alimentarse.El virus prolifera y se propaga por todo el cuerpo del insecto, infectando gradualmente todo el cuerpo y finalmente provocando la muerte.Los resultados de este estudio indican que el AcMNPV tiene buena actividad biológica contra las larvas de Spodoptera frugiperda.Su LC en los días 7 y 10 fue 4,1x107 y 2,9x107PIB/m, respectivamente, y mostró buenos efectos de control en el campo.La suspensión mixta de 10 millones de AcMNPV.Bt (1500 ml/hm2) tuvo buenos efectos de control promedio los días 10 y 15 después del tratamiento, alcanzando 68,99% y 66,87% respectivamente, y fue seguro para los enemigos naturales.Por lo tanto, se debe acelerar el ritmo de investigación y desarrollo para que AcMNPV pueda desempeñar un papel más importante en el control biológico de Spodoptera frugiperda.La suspensión de 10 millones de AcMNPV.Bt producida por Wuhan Chuqiang Biotechnology Co., Ltd. es un compuesto de AcMNPV y el biopesticida Bacillus thuringiensis (Bt), que puede mejorar significativamente la actividad insecticida del virus.Debido a que Bt es un insecticida de amplio espectro con buena actividad insecticida microbiana, cuando AcMNPV se combina con Bt, su toxicidad debería mejorar significativamente en comparación con una formulación única.Esto no sólo amplía la gama insecticida de Bt, sino que también mejora su toxicidad, logrando el objetivo de utilizar una única formulación para controlar múltiples plagas.Esta es también la razón por la que la suspensión de 10 millones de AcMNPV.Bt puede promoverse ampliamente en hortalizas, árboles frutales y arroz.Por lo tanto, se pueden promover 10 millones de AcMNPV.Bt como agente de control verde de Spodoptera frugiperda en maíz.
En este estudio, al realizar pruebas de eficacia de campo, en el caso de una rápida disminución de la población de insectos en el área de control (la tasa de disminución de insectos en el día 15 alcanzó el 47,00%), el efecto de control promedio de los 10 millones de AcMNPV.Bt suspensión (1500mL/hm2) al día 15 después del tratamiento fue del 66,87%, mostrando una rápida tendencia ascendente.Mientras que el efecto de control promedio del pesticida químico 15% metoxazol · indefencarb SC (300 mL/hm2) al día 15 después del tratamiento disminuyó al 51,60%.Aunque se puede observar que la suspensión de 10 millones de AcMNPV.Bt (1500 mL/hm2) tiene un cierto efecto de control sobre Spodoptera frugiperda entre los días 10 y 15, considerando la lenta efectividad de los pesticidas biológicos y la corta vida útil y la superposición de generaciones de larvas de Spodoptera frugiperda, se recomienda aumentar el número de investigaciones y extender el tiempo de investigación cuando realizar pruebas de eficacia de campo de pesticidas biológicos (especialmente preparaciones virales), que pueden lograr resultados experimentales más ideales.Esta es también una limitación de este estudio.En resumen, en comparación con los agentes biológicos, los agentes químicos tienen un efecto letal relativamente mayor sobre las plagas y surten efecto rápidamente.Se pueden utilizar como medida de prevención y control de emergencia durante brotes de plagas.Cuando el daño de las plagas ocurre relativamente levemente, los pesticidas biológicos pueden reemplazar a los pesticidas químicos como una de las medidas ecológicas de prevención y control, reduciendo así la contaminación ambiental y logrando el efecto de proteger la ecología agrícola.
Además, el gen Polh (poliedrina) utilizado en este estudio es un tipo de promotor de proteína poliédrica; él y P10 son el promotor más utilizado en el sistema de vector de expresión de baculovirus (BEVS), los cuales se expresan altamente en la etapa tardía. de infección viral[13].Sin embargo, la actividad del promotor p10 es menor que la del promotor polh, por lo que el promotor polh se utiliza a menudo para la expresión de proteínas exógenas.El gen lef-8 puede codificar la subunidad más grande de la ARN polimerasa propia del virus y es un tipo de factor de expresión tardía.[14].lef-9 es un tipo de factor de expresión tardía que cocodifica la subunidad del complejo proteico con lef-4, lef-8 y p47 en los baculovirus.La investigación ha encontrado que los virus que carecen del gen lef-9 no pueden generar partículas virales con actividad infecciosa, mientras que los virus con el gen lef-9 pueden restaurar la actividad infecciosa del virus restableciéndola.Por tanto, el gen lef-9 es un gen esencial para que los baculovirus formen BV (Budded Virus) con actividad infecciosa[15].Se puede ver que los genes lef-8 y lef-9 tienen un alto conservadurismo en diferentes tipos de virus de poliedrosis nuclear, por lo que los genes lef-8 y lef-9 pueden usarse como base para identificar tipos de virus.Por lo tanto, este estudio utilizó polh, lef-8 y lef-9 como objetos de detección y, a través del alineamiento de la secuencia genética, la homología fue alta, alcanzando todos el 100%.El método de detección molecular rápida verificó una vez más que AcMNPV tiene una buena actividad insecticida contra Spodoptera frugiperda, que es adecuada para una mayor promoción y aplicación en la prevención y control de Spodoptera frugiperda.
Desde 2019, Spodoptera frugiperda invadió China y se convirtió en una importante plaga del maíz.Ha formado una población asentada en algunas zonas del sur y suroeste de China, causando enormes pérdidas a la industria del maíz de China y amenazando gravemente la seguridad alimentaria de China.[dieciséis].Ante la grave situación actual de prevención y control de Spodoptera frugiperda en China, es urgente acelerar la detección y el desarrollo de pesticidas eficientes para la prevención y el control de Spodoptera frugiperda.[17].Aunque los insecticidas virales han limitado su aplicación generalizada debido a su lenta velocidad de acción y su estrecho espectro insecticida, en el contexto de una creciente atención a la ecología y la protección ambiental, se espera que los insecticidas baculovirus se utilicen cada vez más en la producción agrícola debido a sus importantes ventajas sobre pesticidas tradicionales.Debido a la susceptibilidad de los preparados de virus de insectos a condiciones externas como altas temperaturas, luz solar, lluvia y la edad de las plagas[18].Por lo tanto, se recomienda aplicar pesticidas durante el período pico de aparición de larvas de plagas.Es mejor usarlo después de las 4:00 a las 5:00 p. m. en días soleados para evitar el impacto de condiciones ambientales adversas como altas temperaturas y luz, de modo que la formulación del virus pueda desempeñar mejor su función y mejorar el efecto de control de las plagas. .